对硝基苯甲酸（PNB）罗氏培养基

结核分枝杆菌复合群在含有PNB的培养基中生长受到抑制；大多数NTM菌种对PNB有一定的耐受性。分枝杆菌接种到PNB培养基上并与罗氏瓶作生长对照从而起到鉴定NTM与MTC的作用。

1.培养基制备

（1） 基础培养基制作见本章第一节“一、中性罗氏培养基的配制”（本书第209 ～210页）。

（2） PNB溶液的配制和稀释：① 称量1.2 g PNB药粉+10 ml二甲基甲酰胺溶解，倒入稍热的中性罗氏培养基中配成2 400 ml的PNB培养基。确保培养基的终浓度为500 μg/ml。② 混匀，无菌分装8 ml/管，85℃凝固50 min。

2.培养基的保存、注意事项　参照本章第一节“一、中性罗氏培养基的配制”（本书第209 ～210页），PNB的溶解须少量多次与微热的鸡蛋罗氏培养基混合方可充分溶解。(https://www.daowen.com)

3.质量控制

（1） 冷却后的整批培养基或抽取一部分，置于37℃孵育24 h进行无菌试验。对质量不合格的培养基，如出现气泡、干涸、量不足及发生污染等，必须废弃。

（2） 每批PNB培养基应抽取部分接种阳性对照株（堪萨斯分枝杆菌，ATCC12478）和阴性对照菌株（结核分枝杆菌H37Rv，ATCC27294），观察生长情况。

4.储存条件　2 ～8℃冰箱。

5.有效期　1个月内使用，确保培养基质量。