一、培养基制备

1.基础培养基制作　见前文第二节“一、Middlebrook 7H9液体培养基”中的配制标准操作规程（见本书第215 ～216页）。

2.含药培养基

（1） BACTEC MGIT 960 SIRE Kit：4 ～13 d定性药敏实验。试剂盒：包括4瓶冻干的药物，8瓶20 ml SIRE添加剂。

BACTEC MGIT SIRE药物，包括：链霉素（Streptomycin，STR）332 g，异烟肼（Isoniazid，INH）33.2 g，利福平（Rifampin，RFP）332 g，乙胺丁醇（Ethambutol，EMB）1 660 g。

BACTEC MGIT SIRE添加剂，每20 ml含：牛血清蛋白（Bovine albumin）50 g，触媒（Catalase）0.03 g，葡萄糖（Dextrose）20 g，油酸（Oleic Acid）0.6 g。

（2） 自行配制抗结核药物溶液的浓度见表13—5—1—1，药粉应从厂家取得纯品，并确认纯度和效价，在有效期内使用。药物的溶解与效价计算，按不同药物标定的效价精确计算其有效含量，分别计算每种药物应加入的溶剂体积，效价公式为：效价=纯度×活性成分×（1—水分含量）。（3） 加入0.8 ml的BACTEC MGIT SIRE添加剂（菌株复苏液）到7H9培养管内。(https://www.daowen.com)

表13—5—1—1　含药培养基药物浓度及加入MGIT 培养管药物终浓度表

（续表）

（4） 一线抗结核药物冻干药粉的复溶：用4 ml无菌的蒸馏/去离子水重新溶解每种临界浓度的药物。充分混合，保证药物完全溶解。

（5） 7H9培养基中添加药物：向每个贴有标签的7H9培养管中添加0.1 ml（100 μl）复溶的药液。培养基中药物浓度见上表13—5—1—1。