Kinyoun抗酸染色

三、Kinyoun抗酸染色

该染色法又称冷抗酸染色。当涂膜较厚时，此方法会出现抗酸染色假阴性情况，推荐热染法。

（一） 染色液配制

1.石炭酸复红染液

（1） 配方： 碱性复红4 g，95%乙醇20 ml，石炭酸8 ml，蒸馏水100 ml。

（2） 配制方法： ① 将碱性复红溶于95%乙醇，然后边摇边加入蒸馏水（缓慢）。② 将石炭酸放入56℃水浴箱中熔化后，用吸管取8 ml到染色液中。

2.脱色剂 浓盐酸3 ml，95%乙醇97 ml。

3.复染液 亚甲蓝0.3 g，蒸馏水100 ml。

（二） 染色步骤(https://www.daowen.com)

1.涂片烤片机上烘干，或涂片自然干燥后，火焰固定（在5 s内将玻片置于火焰上3 ～4次）；

2.放置在染色架上，玻片间距保持1 cm以上的距离，玻片两端顶部悬空；

3.滴加石炭酸复红染液，盖满涂膜，保持染色5 min；

4.流水自玻片上端轻缓来回冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余水分；

5.滴加盐酸乙醇布满玻片，脱色2 min；如有必要，需流水洗去脱色液后，再次脱色至无可视红色为止；

6.流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去脱色液，沥去玻片上剩余水分；

7.滴加亚甲蓝复染液，染色2 min；

8.流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去复染液，然后沥去标本上剩余水分，待玻片干燥后镜检。