五、弱抗酸染色

五、弱抗酸染色

怀疑诺卡菌感染时用这一染色方法，分枝杆菌、诺卡菌为红色。

（一） 染色液配制

1.石炭酸复红染液配制　同“三、Kinyoun抗酸染色”（本页上半部分）。

2.脱色液　1%硫酸（1 ml硫酸缓慢加到99 ml蒸馏水中）或0.5%盐酸乙醇（0.5 ml浓盐酸溶于99.5 ml的70%乙醇中）。

3.亚甲蓝染液　亚甲蓝2.5 g溶于100 ml 95%乙醇中。

（二） 染色方法

1.涂片自然干燥；

2.取一张涂片6 s内在酒精灯火焰上来回过火5 ～6次，以烫手背为准；(https://www.daowen.com)

3.放置在染色架上，立即滴加石炭酸复红染液，布满涂片；

4.玻片间距保持1 cm以上的距离，玻片两端顶部悬空，保持染色5 ～10 min；

5.流水自玻片上端轻缓来回冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余水分；

6.滴加1%硫酸或0.5%盐酸乙醇布满玻片，脱色2 min；如有必要，需流水洗去脱色液后，再次脱色至无可视红色为止；

7.流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去脱色液，沥去玻片上剩余水分；

8.滴加亚甲蓝复染液，染色1 min；

9.流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去复染液，然后沥去标本上剩余水分，待玻片干燥后镜检。