固体药敏培养基
罗氏培养基内加入一定量的抗结核纯品药物成为含药培养基，结合中性罗氏培养管可进行比例法药敏检测和绝对浓度法药敏检测。
1.对照培养管是中性罗氏培养基 制作见本章第一节“一、中性罗氏培养基的配制”（本书第209 ～210页）。
2.含药培养基的配制
（1） 抗结核药物溶液的配制和稀释
1） 主要抗结核药物：异烟肼（INH）、利福平（RFP）、链霉素（STR）、乙胺丁醇（EMB）、阿米卡星（AMK）、莫西沙星（MXF）、左氧氟沙星（LVLX）、乙/丙硫异烟胺（ETH/PTH）、利福布汀（RFB）、卡那霉素（KAN）、氧氟沙星（OFX）、加替沙星（GFX）、卷曲霉素（CM）、对氨基水杨酸（PAS）等。
2） 药敏试验用抗结核药物应从厂家取得纯品，并确认纯度和效价，在有效期内使用。
3） 在无菌容器内称取药物粉末，为减少称量误差，每次应至少称重10 mg。
4） 按不同药物标定的效价精确计算其有效含量，分别计算每种药物应加入的溶剂体积，药物浓度见表13—4—1—1，效价公式为：效价=纯度×活性成分×（1—水分含量）。
5） RFP、ETH/PTH、RFB药粉用二甲基甲酰胺溶解后加灭菌蒸馏水稀释；ETH/PTH也可以使用去离子水配置的乙二醇溶液溶解；RFB可以使用去离子水配置的甲醇溶液溶解；OFX或LVLX等喹诺酮类药物用1% NaOH溶解后加灭菌蒸馏水稀释；其他药物直接用灭菌蒸馏水溶解、稀释。
6） 每种药物按表13—4—1—1所示制成相应药物浓度，再按比例配成培养基药物浓度。
表13—4—1—1 含药培养基药物浓度及加入LJ 培养基药物浓度表
（续表）
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（2） 每100 ml基础中性罗氏培养基加入1 ml配制、稀释好的有一定浓度的抗结核药液，混匀，无菌分装7 ml/管，85℃凝固50 min。
3.培养基的保存 同中性罗氏培养基（见本书第210页）。
4.培养基制备的注意事项
（1） 在培养基制备间内进行，制备培养基时应有相应原始记录。
（2） 培养基制备前应对培养基进行消毒。
（3） 制备培养基的所有物品均应高压灭菌。
（4） 药物应充分溶解。
（5） 85℃加热是使培养基固化，而不是灭菌，所以整个操作应在无菌条件下进行。
（6） 培养基凝固时，温度过高或时间过长都会降低培养基的质量，培养基褪色可能是因为温度过高。培养基表面出现气泡说明凝固有差错。
（7） 凝固时最好采用蒸汽凝固器，此时培养基受热均匀。
5.质量控制
（1） 冷却后的整批培养基或抽取一部分，置于37℃孵育24 h进行无菌试验。对质量不合格的培养基，如出现气泡、干涸、量不足及发生污染等，必须废弃。
（2） 每批培养基应抽取部分接种质控菌株（结核分枝杆菌H37RV标准株，ATCC27294）10—3 mg，观察生长情况，以确定培养基质量：对照培养基菌落数在200个或占斜面2/3以上，含药培养基无生长，为敏感。