Middlebrook 7H9液体培养基

一、Middlebrook 7H9液体培养基

Middlebrook 7H9是一种复合培养基，主要用于MGIT960、BacT/AlERT 3D、ESPⅡ等自动化培养系统的分枝杆菌的液体培养。培养基含有丰富的营养，能满足分枝杆菌生长所需的碳源和氮源；磷酸盐为缓冲剂，能维持培养基的pH；培养基同时加入牛血清蛋白、油酸等营养增强剂，以及加入复合抗生素抑制杂菌的生长。

1.配方 见下页表13—2—1—1。

2.配制方法

（1） 称量化学组分，与800 ml去离子水混合，各组分充分溶解后，去离子水补充至1 000 ml，121℃蒸汽灭菌20 ～30 min。

（2） 称取营养增强剂组分，加800 ml生理盐水充分溶解后，以6N NaOH（或1N HCL）调整溶液的pH为6.5 ～6.8，补充生理盐水至1 000 ml；该溶液使用亲水微孔滤膜或滤器（孔径≤0.22 μm）除菌。

表13—2—1—1　7H9 液体培养基的配方

（3） 每管化学组分溶液分装7 ml到无菌培养管中。(https://www.daowen.com)

（4） 接种菌株前，化学组分溶液加入营养增强剂充分混合，使其达到9 ∶1的比例，同时加入复合抗生素作为杂菌抑制剂，使溶液达到药物的最终浓度。

3.培养基的保存　质量合格的培养基，注明日期后分装于防潮包装内，4℃保存。保存期不能超过4周。

4.注意事项　营养增强剂与复合抗生素须在接种菌株或标本前加入，以确保营养增强剂不会变质，抗生素浓度不会衰减下降。

5.质量控制

每批培养基应进行表观检查，抽取部分做无菌试验，部分接种分枝杆菌标准株菌悬液0.5 ml，观察生长情况，见表13—2—1—2。

表13—2—1—2　培养基的质量控制