二、标本前处理
（一） 标本的核对
准确核对患者的申请单信息，标本的条码是否与申请单符合，标本标签上患者信息是否与申请单符合，标本种类是否与申请单符合，标本是否合格等（编号则为实验室的流水号：为结核菌培养记录表中的连续编号）。
（二） 标本编号
将固体培养基从冷藏环境中取出，室温下放置，待罗氏培养基恢复至室温，在罗氏培养管的盖子进行实验室编号。
（三） 生物安全柜操作
提前开启生物安全柜，确认生物安全柜的负压和定向气流运行正常，准备废弃物容器及消毒液。
（四） 配制2% NaOH—NALC消化液
针对要处理不同标本数量，将4% NaOH与2.94%枸橼酸钠按1 ∶1的比例配制适量的混合液，加入N—乙酰半胱氨酸，使其浓度达到0.5%～2%（W/V）备用。
（五） 有菌标本的预处理（NaOH—NALC法）
1.标本中加入消化液 根据标本的黏稠程度，加入不同体积的2% NALC—NaOH消化液。
（1） 脓痰、黏稠痰、浑浊的口水，需加入2 ～3倍体积的消化液；黏液痰、稀薄血痰、清亮的口水痰，先将不足5 ml的痰液用蒸馏水补充到5 ml，再加5 ml消化液。
（2） 胃液、淋巴穿刺液、灌洗液、支气管洗刷物、渗出液：少于10 ml，加入等量的消化液；多于10 ml，先3 000 g离心15 min，弃上清，留取5 ml沉淀，加等量消化液。
（3） 尿液：采集晨尿，最好体积不少于40 ml，3 000 g离心15 min，弃上清，留取5 ml沉淀，加入2 ～3倍体积的消化液。
（4） 粪便：对于成型粪便，用竹签取0.5 ～1 g（绿豆大小），于50 ml尖底离心管中，沿着管壁研磨均匀，加10 ml无菌蒸馏水用竹签混匀，使之成为混悬液，切勿上下震荡，严禁离心管盖子接触到粪便，静置5 ～10 min，用吸管将底部沉淀弃去，留5 ml上清液；如果是水样便，取2 ml于50 ml尖底离心管中。加入3倍体积消化液。(https://www.daowen.com)
（5） 脓液：用无菌吸管取2 ～3 ml标本加入50 ml尖底离心管中，加入3倍体积消化液。
（6） 拭子类标本：先加入无菌蒸馏水5 ml，再加等量消化液，盖紧盖子涡旋振荡20 s后，将拭子沿着管壁拧挤干后弃去。
（7） 一次消化处理标本不超过16个，从消化液加入最后一个标本开始计时，定时20 min。
2.振荡标本管 旋紧容器螺旋盖，接通涡旋振荡器电源，将标本管在涡旋振荡器上振荡7 s左右，取下后接着振荡下一个标本，以此类推，直至最后一个标本。接着，从第一个标本开始振荡，方法同前，进行第二轮标本振荡，再进行第三轮振荡。将离心管倾斜倒置，轻轻在工作台面上拍打2次，转个方向继续拍打，共计转4个方向拍打8次（目的是将离心管盖上隐蔽处的标本暴露，与消化液充分反应，杀死杂菌，减少污染率）。拍打完毕后，再继续进行一轮的涡旋振荡，直至标本充分液化，每个标本总的振荡时间不超过32 s。
3.将标本管置于试管架内，平放，室温静置，偶尔用手轻轻摇动。消化期间，如果标本黏稠或浊度很浓，可适当弃去一部分标本再加入少许消化液，涡旋振荡。
4.加入pH为6.8 PBS（0.067 mol/L）缓冲液至50 ml标记的刻度，混匀。
5.放入冷冻离心机中，3 000～3 800 g离心15 min，取出标本管，置生物安全柜内看着底部沉淀，小心将上清液倒入防喷溅的、含有消毒剂的容器中。小心倾去上清，不要倒掉沉淀。一旦看到沉淀悬浮，直立标本管，用无菌吸管将上清液吸出弃去。
6.用无菌吸管向每一个标本管中加入磷酸盐缓冲液0.5 ～1.0 ml，形成混悬液。（六） 无菌标本的处理
1.CSF、胸腹水（须抗凝处理，每毫升标本加入0.2 mg肝素）、骨髓
（1） 若为无菌标本量小于500 μl，可直接接种；
（2） 若标本量＞500 μl，离心3 000 ～3 800 g，15 min，取沉淀接种；
（3） 若怀疑标本受污染时，须经去污染，加入等量消化液，具体操作同稀薄痰液。
2.组织 消毒剪刀，将组织放在浅口的无菌盖子上，用剪刀剪碎，加0.5 ～1 ml蒸馏水，将标本转移至离心管中强力涡旋振荡22 s，破坏红细胞，室温静置15 ～20 min，用无菌吸管取管底部分标本接种。