液体培养基药敏试验

液体药敏试验最常用的液体培养基Middlebrook 7H9，常与自动培养系统结合应用。液体培养目前已经与现代先进的仪器设备、技术进行结合，较固体培养灵敏度高而所需时间短，但需要设备昂贵和耗材成本较高，以及操作相对复杂、较易发生污染等不利因素限制了其在不发达国家和地区的使用。大量的研究已经证实，液体培养的阳性率高于固体培养的阳性率在10%以上，而且阳性结果多在1 ～3周内报告，报告阴性结果则在培养满6周后，总体较固体培养缩短了2 ～3周的报结果时间。而后续的液体药敏试验一般需要10 ～14 d，较具体药敏试验的4周又有明显缩短。液体培养联用液体药敏试验，累计所需时间3 ～4周，较固体培养基方法的2 ～3个月存在明显的优势，对于及时指导调整患者用药方案有重要意义。

1.我国最为常用的液体培养系统 有以下2种。

（1） BACTEC MGIT 960全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏系统：以Middle brook 7H9为基础，添加配方优良的BBL PANTA TM抗菌剂和OADC营养剂，实现了分枝杆菌的快速培养。由于采用一种荧光物质作为分枝杆菌生长指示剂，因此也称为分枝杆菌生长指示管法（mycobacteria growth indicator tube，MGIT），是目前使用最为广泛的分枝杆菌培养、鉴定、药敏系统。对多个报道的系统性分析显示，结核分枝杆菌平均报告阳性结果时间为14.4 d，最快10 d。(https://www.daowen.com)

（2） BACT/AlERT 3D全自动快速结核分枝杆菌培养检测系统：其原理是当检测标本经前处理接种于专用的7H9培养管后，如有分枝杆菌生长时，分枝杆菌生长过程中代谢产生CO2，导致pH改变，传感器颜色从绿色变为黄色，仪器每10 min自动连续地检测、报告结果。BacT/AlERT 3D在试验操作、诊断效能、使用范围方面与MGIT960接近。

液体培养基药物敏感性试验同液体培养一样，一般需要特定的设备，用于分枝杆菌液体培养的设备同样也可用于液体药敏试验。液体药敏试验有与固体药敏试验相似的菌悬液制备过程，所不同的是制备好的菌液接种到含不同药敏的液体培养管中，之后由专用设备检测培养管中细菌的生长状态，以含药培养管中菌量超过对照不含药培养管中菌量的1%时定义为耐药。目前商业化的液体药敏试验技术包括的药物种类很多，包括目前唯一被WHO认可的吡嗪酰胺药敏试验方法也是液体培养基方法。WHO在全球范围内推荐使用液体培养，在发达国家和地区液体培养已非常普及，并且有些地区已经完全取代了固体培养基法。液体培养虽然较固体培养报告结果的时间缩短，然而仍不能满足临床中需要在患者就诊期间及时获得实验室结果的要求，并且技术操作复杂、价格较昂贵、易于发生污染等特点，导致此项技术还不能在经济欠发达地区广泛使用。

2.板式药敏试验 这是以自动化设备为基础的液体药敏试验的一个变通方法，由于不需要特殊设备、试剂耗材价格便宜，但又具有液体药敏试验需要时间短的优势，因此具有很强的实用性。板式药敏试验技术目前已经有商业化的产品，在培养板上不同孔里包被不同的带检测药物，用户使用时仅需添加一定体积的液体培养基，之后将已制备好的菌悬液接种至孔中，然后将培养板放至培养箱中孵育培养，1 ～2周内通过肉眼观察不同孔中细菌生长的浊度变化即可判断细菌是否耐药。已有的报道显示，板式药敏试验技术与固体药敏试验和液体药敏试验有很好的一致性，表明这项技术在耐药诊断方面具有应用价值。