改良I—K抗酸染色

七、改良I—K抗酸染色

适用于L型分枝杆菌染色。

1.染色剂

(1) 碱性复红3 g,溶于20 ml 95%乙醇,加苯酚8 ml、蒸馏水80 ml,溶解后过滤,临用前加0.1 ml吐温—80。

(2) 脱色剂:0.5%盐酸乙醇(浓盐酸0.5 ml加入95%乙醇溶液100 ml)。

(3) 复染剂:亚甲蓝0.1 g溶于0.2%乙酸100 ml。

2.染色步骤(https://www.daowen.com)

(1) 涂片于空气中自然干燥后,丙酮固定,或石蜡切片4 μm经脱蜡后,蒸馏水清洗(玻片倾斜,水自一端流下,不可直接冲洗)。

(2) 加苯酚品红液后置湿盒内,于室温24 h后细流水洗。

(3) 加脱色剂,脱至无红色为止。

(4) 加复染剂复染0.5 ~2 min,水洗后干燥,镜检。病理切片水洗后,用95%乙醇处理数秒,无水乙醇脱水,二甲苯透明处理,中性树胶封固后镜检。

注意事项:载玻片需用清洁液浸泡过夜,自来水充分冲洗,最好用黏附剂(如多聚赖氨酸或APES等)处理后,晾干备用。染色时用一张阳性片作为对照。染色剂使用一段时间后,如效果不好,可再加吐温—80少许。