六、注意事项

1.由于消化液在杀死杂菌的同时，也杀死20%～90%的分枝杆菌，消化液浓度越高杀死的菌量越多，消化液在标本中的终浓度不要超过2%。

2.推荐使用50 ml尖底离心管作为患者收集标本管，除了粪便、脓痰、黏稠痰、脓液，对于标本量少于5 ml的有菌标本，用蒸馏水将标本补足到5 ml，再加等量消化液消化，避免加入过多消化液杀死分枝杆菌。

3.无菌体液尽量不要使用消化液处理，易发生凝固的标本要抗凝。

4.加入消化液后，要充分涡旋振荡标本，至少三遍，每次7 s左右，否则培养基很容易被杂菌污染。消化期间，标本管最好平放，让消化液持续接触到标本管的管壁和盖子，便于杀死盖子及管壁上的杂菌。很多污染发生的主要原因就是消化时振荡次数少或振荡时间不够，标本未彻底液化所造成。(https://www.daowen.com)

5.标本离心时，离心力要达到3 000 ～3 800 g，标本离心结束后，要及时倾倒上清，否则放置时间久，倾倒上清时标本沉淀易悬浮而被倒掉；倾倒上清时一定要看着沉淀，一旦沉淀悬浮，要用无菌吸管吸取上清。

6.培养阳性标本，用涂片抗酸染色证实时，刮取菌量不要多，涂抹均匀；脱色时，加入的盐酸乙醇量要足，要加满玻片，脱色时间3 min，避免由于脱色时间短或脱色液不足或涂片太厚造成的假阳性。

7.罗氏培养基上生长的诺卡菌，抗酸染色易出现假阳性，特点是涂片厚的地方阳性菌多，薄处阳性菌少甚至无，总体分布是绝大部分抗酸染色阴性，部分菌体为阳性，碰到有上述特点的涂片，要结合菌落报培养结果，诺卡菌落一般为干燥、橘黄色。对于上述现象，对于纯培养菌落，切记不能误认为分枝杆菌培养阳性有污染而误导临床。

8.罗氏培养基上生长的部分非结核分枝杆菌，用抗酸染色证实时，镜检出现涂片厚处有分层现象，上部菌体为阳性，下部菌体为阴性，薄处菌体基本为阳性；总体分布是大部分菌体为阳性，少数菌体为阴性，结合菌落报结果，排除有污染菌落。非结核分枝杆菌一般菌落较湿润、呈橘黄色或奶酪色。