金胺O—罗丹明染色

四、金胺O—罗丹明染色

(一) 染色液配制

1.染液 金胺O 1.5 g,罗丹明0.75 g,甘油75 ml,石炭酸10 ml,蒸馏水50 ml。将上述各种溶液混合均匀(利用磁性搅拌器搅拌24 h,或微微加热后强力搅拌5 min),再用玻璃纤维过滤,装于玻璃瓶,储存于4℃冰箱,可保存数个月之久。

2.脱色液 0.5 ml浓HC1溶于100 ml的70%乙醇。

3.复染液 0.5%高锰酸钾。

(二) 操作步骤

1.将涂片自然干燥或加热器加热至65℃烘干。(https://www.daowen.com)

2.加上金胺O—罗丹明染液于涂片上。

3.置室温或35℃染色15 min。

4.以蒸馏水冲洗。

5.用0.5%盐酸乙醇脱色2 ~3 min,以蒸馏水冲洗。

6.用0.5%高锰酸钾水溶液(过滤后保存于棕色瓶)复染,2 ~3 min(不可太久以免亮度消失)。

7.再以蒸馏水冲洗,干燥后镜检。