共聚焦激光显微内镜

五、共聚焦激光显微内镜

共聚焦激光显微内镜(confocal laser endomicroscopy)是在内镜的末端加上一个极小的激光共聚焦显微镜,可以在内镜检查的同时获取消化道上皮及上皮下高度放大的横截面的图像,从而在内镜下做出组织学诊断并指导靶向活检。

共聚焦内镜可以实时、活体、无创地显示病变的细胞和亚细胞结构,断层显示病变的微细结构。共聚焦内镜可以将黏膜放大1000倍,能在活体中对细胞和亚细胞结构进行观察,还能对表层黏膜细胞250μm深度的固有层进行观察,并可将断面影像进行重建而显示其三维结构,获得黏膜表面及表面下结构的组织学图像,对黏膜病变做出即时的组织学诊断,达到光学活检的目的,高清晰显示胃肠黏膜的细胞结构、结缔组织和血管准确率。

【原理】

共聚焦激光显微内镜是在传统的电子内镜基础上整合共聚焦激光显微镜而成,其成像原理与共聚焦激光显微镜相同。在单点扫描共聚焦显微镜中,以光栅模式扫描某点,测量从连续的点返回到检测器的光并将其数字化,从而构成扫描区域的二维图像,每一图像的形成均为一“光学”成分,代表组织中的局部平面。将激光扫描共聚焦显微镜安装于传统电子内镜远侧头端组合而成共聚焦激光显微内镜,单根光纤同时充当照明点光源和检测针孔,在做标准电子内镜检查外,同时进行共聚焦显微镜检查。

外源性荧光剂的使用可使共聚焦成像更鲜明,更突出。目前最常用的荧光剂有10%荧光素钠(静脉使用)和0.05%盐酸吖啶黄(表面喷洒)。荧光素钠价廉,无致突变作用,主要分布于消化道整个黏膜层,不进入上皮细胞的细胞核,故在共聚焦内镜下不易观看到细胞核,但细胞、血管和结缔组织分辨力较高。静脉注射荧光素钠的患者可能出现一过性的皮肤黄染。盐酸吖啶黄可使黏膜表层(自黏膜表面至黏膜下50µm)细胞的细胞核和细胞质染色,可显示细胞核的形态,表面喷洒后数秒内吸收,因而对不典型增生和肿瘤的检测极为有利。但盐酸吖啶黄有极轻微的致突变活性,临床应用须谨慎。

(陈巍峰 何梦江 陈天音)