四、诊断标准
(一)诊断方法
1.病原学检查
对髂骨、淋巴结、脾脏等病变部位穿刺涂片检测,若原虫量较少,涂片检查有困难,则可将穿刺物通过合适培养基培养后检测活动的前鞭毛体,或将穿刺物接种于易感动物,待动物发病明显时取肝、脾做涂片检查[1]。
2.影像学检查
脾功能亢进者,经B超检查显示肝大、脾大。
3.聚合酶链式反应(PCR)检测
检测患者体内利什曼原虫的动基体DNA (k DNA)、核糖体RNA (r RNA)、微外显子(mini-exon)及基因组DNA重复序列等,其特异性与敏感性均较高。在黑热病的临床诊断中,PCR技术具有较大的发展潜力,有早期诊断与考核疗效的价值,特别是在黑热病的无症状感染和亚临床型的诊断方面有独特优势。
4.免疫学检查
常用的方法有直接凝集试验、间接荧光抗体技术(IFAT)及酶联免疫吸附试验(ELISA)等。以r K39重组蛋白研制的免疫诊断试条法(ICT)具有较好的诊断价值。血清循环抗原(c Ag)的检测对本病的早期诊断和疗效考核具有重要意义。
5.血象检查
血象检查可见全血细胞减少,其中白细胞数减少最明显,主要是中性粒细胞减少,甚至可完全消失。嗜酸性粒细胞数亦减少,患者常有中度贫血。血小板计数明显降低,红细胞沉降率增快,血浆中球蛋白量显著增多,故球蛋白水试验呈阳性,麝香草酚浊度试验也呈阳性[1]。
(二)诊断原则
1.诊断依据
(1)流行病学史 在黑热病流行区内居住,或曾在5-9月白蛉成虫活动季节内有流行区居住史。
(2)临床症状 长期不规则发热、盗汗、消瘦,有进行性脾大、轻度或中度肝大,有全血细胞减少和高蛋白血症,或有鼻出血及齿龈出血等症状。(https://www.daowen.com)
(3)免疫学检测 直接凝集试验(DAT)、IFAT、ELISA、r K39重组蛋白研制的ICT,上述任意一种免疫学方法检测结果为阳性。
(4)病原检测 在骨髓、脾或淋巴结等穿刺物涂片上查见利什曼原虫无鞭毛体,或将穿刺物注入三恩氏(NNN)培养基内培养出利什曼原虫前鞭毛体。
2.疑似病例
有流行病学史及相应的临床表现者。
3.临床诊断病例
符合疑似病例诊断标准且上述任意一项免疫学检査阳性者。
4.确诊病例
符合疑似病例诊断标准且病原学检査阳性者。
(三)鉴别诊断
1.播散性组织胞浆菌病
该病临床表现与黑热病极相似,患者大多在南方诸省、市、区,临床表现有肝、脾肿大,发热,贫血,白细胞和血小板减少,体重下降等症状和体征。组织胞浆菌也寄生于巨噬细胞内,涂片中观察到的病原体形态也与利什曼原虫无鞭毛体极相似。但可从以下特征进行鉴别:组织胞浆菌较利什曼原虫无鞭毛体稍大,外膜较厚,菌体内无特定构造,也无动基体类似结构。组织胞浆菌在染色后因胞壁收缩而在菌体周围出现一层未着色的空晕。可用真菌培养法或组织胞浆菌皮内试验来确定诊断。
2.马尔尼菲青霉菌病
该病在我国南方的广东、广西、湖南诸省(自治区)都有发生,患者有发热、肝脾大和贫血等症状,常被误诊为黑热病。但播散性马尔尼菲青霉菌病患者常有咳嗽等肺部症状,X线透视可见肺部有炎性阴影,白细胞常增多,有时在体表可发生丘疹、结节和脓肿,皮损可自行愈合。在骨髓、淋巴结穿刺物涂片上可见大量菌体在巨噬细胞内聚集成桑葚状或葡萄串状,菌体内无一定结构。
3.恶性组织细胞病(恶性组织细胞增生症)
该病多见于青少年,男性多于女性。临床表现极为复杂,主要有持续不规则发热、乏力、消瘦、衰竭,红、白细胞减少,同时伴有肝、脾和淋巴结肿大,黄疸和皮疹等。血涂片上有时可查见异常组织细胞。骨髓涂片上可见异常组织细胞,以及吞噬有红、白细胞的巨噬细胞,这些检查对本病有重要的诊断价值。患者的病程大都为6个月至1年,病死率极高。