实训13　CMT法检测牛乳房炎

实训13　CMT法检测牛乳房炎

【实训任务】

掌握CMT（加利福尼亚乳房炎检测）法测定牛隐性乳房炎的方法，为临床上正确诊断和治疗乳房炎打下基础。

【实训材料】

健康牛及乳房炎患牛的新鲜奶样各若干份。离心机、10 mL刻度离心管、中性滤纸、10 mL试管、载玻片、5 mL吸管、乳房炎检验盘、烷基硫酸钠（或烷基烯丙基硫酸钠，烷基硫酸钾及烷基烯丙基硫酸钾）、苛性钠、溴甲酚紫、蒸馏水等。

【实训内容及步骤】

1.原理 用一种阴离子表面活性物质——烷基或烃基硫酸盐破坏乳中的体细胞，释放其中的蛋白质，蛋白质与试剂结合沉淀或凝集。细胞中聚合的DNA是CMT产生阳性反应的主要成分。乳中体细胞数越多，释放的DNA越多，产生的凝胶也就越多，凝结越紧密。

2.试剂配方 烷基硫酸钠（或烷基烯丙基硫酸钠，烷基硫酸钾及烷基烯丙基硫酸钾）30～50 g、苛性钠15 g、溴甲酚紫0.1 g、蒸馏水1000 mL。

3.步骤 先将2 mL被检乳置于塑料乳房炎检验盘中，再加入试剂2 mL，缓慢作同心圆状搅拌10 s，观察判定。判定标准见表4.1。

表4.1　CMT判定标准

【实训报告】

每组同学将判定结果填入表4.2中。

表4.2　判定结果