二、沉淀试验

（一）原理

1.液相沉淀试验

可溶性抗原与相应抗体结合，在电解质存在下，形成肉眼可见的白色沉淀。

2.琼脂扩散试验

该试验为可溶性抗原与相应抗体在含有电解质的半固体凝胶（琼脂或琼脂糖）中进行的一种沉淀试验。琼脂在试验中只起网架作用，含水量为99%，可溶性抗原与抗体在其间可以自由扩散。若抗原与抗体相对应，比例合适，在相遇处可形成白色沉淀线，反之则不会出现沉淀线。

3.免疫电泳试验

该试验是将凝胶扩散置于同一电场中，在一定条件下，抗原及抗体离解成为带正电或负电的电子，在电场中向异相电荷的电极移动，所带净电荷量越多、颗粒越小，泳动速度越快，反之则慢。由于电流加速了抗原、抗体的运行速度，缩短了两者结合的时间，加快了沉淀现象的产生。当有多种带电荷的物质电泳时，由于各自所带净电荷不同，而区分成不同区带，使抗原决定簇不同的成分得以区分。

（二）操作步骤

液相沉淀试验是将试验抗原（或抗体）和待检样品加入小口径试管内混匀，一段时间后，在液面处出现环状沉淀现象，即为阳性反应。

1.琼脂扩散试验

首先用1%琼脂浇成厚2～3 mm 的凝胶板，在上面打梅花孔，于相邻孔内滴加抗原和抗体，在湿盒中扩散2～3 d，观察沉淀带。测抗原时，一般形成3种沉淀带，两相邻孔为同一抗原时，2 条沉淀带完全融合，若二者在分子结构上有部分相同的抗原决定簇，则两条沉淀带不完全融合并出现一个叉角。2种完全不同的抗原则形成2 条交叉的沉淀带。不同分子的抗原抗体系统可各自形成2 条或更多的沉淀带。测抗体时，加待检血清的相邻孔要加入标准阳性血清作为对照。测定抗体效价时可倍比稀释血清，以出现沉淀带的血清最大稀释度为抗体效价。

2.免疫电泳试验

先将抗原样品在琼脂平板上进行电泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开，之后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比例适当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形，对照已知抗原、抗体形成的电泳图，分析样品中所含成分。