形态学特征与培养特性

（一）形态与染色

牛分枝杆菌为较粗短、直或微弯曲的杆菌，单在、少数成丝，无芽孢，无鞭毛，无荚膜，大小为（0.3～0.6）μm×（1.0～4.0）μm。与一般革兰氏阳性菌不同，本菌细胞壁不仅有肽聚糖，而且有特殊的糖脂，含量超过菌体重量的10%，远远超过其他细菌类脂的含量。糖脂包括阿拉伯半乳糖复合物及分枝菌酸，由于糖脂的存在，致使革兰氏染色不易着色。齐尼（Ziehl-Neelsen）抗酸染色呈红色，因其具有抗酸染色特性，故又称为抗酸性分枝杆菌。

（二）培养特性

牛分枝杆菌对营养要求高，专性需氧。最适温度为37℃，低于30℃或高于42℃不生长，pH 以6.4～7.0 为宜。常用的培养基有罗杰二氏（Lowenstein-Jensen）固体培养基（内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿）、改良罗杰二氏培养基、丙酮酸培养基和小川培养基。孔雀绿可抑制杂菌生长，便于分离和长期培养。蛋黄含脂质生长因子能刺激生长。牛分枝杆菌细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质的吸收，故生长缓慢，在固体培养基上2～4 周才可见菌落生长。典型菌落为粗糙型，呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明。在液体培养基中，由于细菌含脂质量多，具疏水性，并有需氧要求，易形成有皱褶的菌膜浮于液面。有毒力菌株在液体培养基中可呈索状生长，无毒菌株则无此现象。

（三）生化特性

牛分枝杆菌不发酵糖类，也不能合成烟酸和还原硝酸盐。牛分枝杆菌酶试验为阳性，热触酶试验为阴性。