四、中和试验

四、中和试验

(一)原理及分类

病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力,称之为中和试验。本试验主要用于一是从待检血清中检出抗体,或从病料中检出病毒,从而诊断病毒性传染病。二是用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型。三是测定抗病毒血清或抗毒素效价。四是新分离病毒的鉴定和分型。中和试验不仅可在易感的实验动物体内进行,而且可在细胞培养上或鸡胚上进行。试验方法主要有简单定性试验、固定血清稀释病毒法、固定病毒稀释血清法、空斑减少法等。

(二)操作步骤

该试验是以病毒对宿主或细胞的毒力为基础,首先需要根据病毒的特性选择合适的细胞、鸡胚或实验动物测定病毒效价,之后将抗血清和病毒混合,经一段时间作用,接种于宿主系统以检测混合液中的病毒感染力。最后根据其产生的保护效果的差异,判断该病毒是否已被中和,并按规定的方法计算中和抗体的效价。

中和试验极为特异和敏感,具有严格的种、型特异性。利用同一病毒的不同型的毒株或不同型标准血清,即可测知相应血清或病毒的型。该试验与攻毒保护试验高度相关,中和抗体的水平可显示动物抵抗病毒的能力。其不足之处在于重复性不太理想,试验周期长、操作繁琐,不适用于大规模监测。细胞培养技术相对复杂,需要一定的设备和技术。