免疫组织化学方法

本方法也是一种经典的BSE 检测方法，还是世界动物卫生组织规定的疯牛病检测金标准，是疯牛病确诊方法之一。该方法的原理是待检样品的组织切片经过蛋白酶K 消化后，先用疯牛病PrP 抗体与脑部朊病毒发生免疫反应，然后用标记有生物素的二抗与PrP 抗体结合，再用亲和素与过氧化物酶的结合物进行孵育，每个生物素有4 个部位可以与亲和素发生反应，并且结合紧密，因此一个朊病毒分子可以被放大4 倍，最后用AEC 底物孵育处理显示颜色，镜检观察结果。免疫组织化学的反应时间约需6 h，但从样品处理到出结果共需15 d。如果PrP 抗体的性能是优良的，那么本方法的特异性和敏感性均为100%。