一、病原学诊断

（一）病毒分离鉴定

采集病牛的血液，加肝素或柠檬酸钠等抗凝剂，分离白细胞和血小板，将其制成悬液。将白细胞液接种乳仓鼠肾细胞、乳仓鼠肺细胞、绿猴肾细胞传代，37℃条件下培养，隔4～5 d 盲传，如此传代直至出现典型、规律的细胞病变，收获的全细胞培养物用于其他试验。同时也可将接种后表现异常的乳鼠的脑组织悬液接种上述细胞进行培养，4～5 d 后细胞呈现单个、散在、圆缩、脱落等细胞病变。亦可将分离的白细胞液采用悬滴复染法染色，通过电镜观察弹状病毒的结构。也可将观察到的细胞病变的细胞培养物收集起来，应用间接荧光抗体试验（IFA）、免疫组化、原位杂交或RT-PCR 等方法进行鉴定。

（二）检测抗原

通过特异的牛流行热病毒抗血清或单克隆抗体，对牛流行热病毒进行间接荧光抗体试验、免疫组化检测。最常用的是RT-PCR，多选择G 蛋白基因作为检测靶标。利用分子生物学诊断方法，可从牛高热期血液中扩增到牛流行热病毒G 蛋白特异的核酸片段。