口蹄疫血清学诊断

三、口蹄疫血清学诊断

口蹄疫血清学检测有2 种类型:一是检测针对非结构蛋白(NSP)的抗体,该抗体针对病毒所有血清型,用于诊断动物是否感染口蹄疫病毒;二是检测针对结构蛋白(SP)的抗体,该抗体是血清型特异性的,用于评估口蹄疫疫苗免疫效果。

(一)非结构蛋白抗体检测技术

作为口蹄疫病毒通用型抗体检测技术,口蹄疫病毒非结构蛋白较保守,其抗体无型特异性,可用来确证动物过去或现在是否被7 个血清型中的任何一个感染过,在国际贸易中检测不明血清型病例时较检测结构蛋白抗体具有优势。作为口蹄疫病毒感染抗体鉴别检测技术,由于目前使用的口蹄疫疫苗是灭活疫苗,其生产工艺是在病毒纯化过程中去除绝大部分的非结构蛋白,灭活疫苗免疫动物后,动物体内没有病毒增殖,就没有非结构蛋白的表达及其抗体产生。而自然感染动物体内有病毒增殖,在病毒的装配过程中有非结构蛋白的参与,可以刺激机体产生相应的抗体,因此非结构蛋白抗体能鉴别自然感染和免疫动物。非结构蛋白抗体检测的分子基础,主要是基于各非结构蛋白的免疫原性和诱导机体产生抗体的特点,可选择的非结构蛋白有L、2C、3ABC、3D 蛋白。目前我国非结构蛋白抗体检测技术使用最广泛的是ELISA 试验。

(二)结构蛋白抗体检测技术

是血清型特异的,可检测由于免疫和感染而产生的抗体,主要用于确证未免疫动物是否曾经和正在感染某种血清型的口蹄疫病毒,以及检测免疫动物的免疫状态。结构蛋白变异程度高,尤其是VP1 蛋白。该抗体检测技术关键点在于分别制备针对7 种血清型的病毒抗原和抗血清,有效抗原包括活病毒、灭活的病毒抗原“146S”、VP1 蛋白以及结构蛋白合成肽。制备抗原的病毒毒株应与田间毒株接近,抗血清的制备同口蹄疫病毒病原诊断血清分型技术,包括多克隆抗体、单克隆抗体。结构蛋白抗体检测技术种类较多,包括病毒中和试验、液相阻断ELISA、正向间接血凝试验和结构蛋白ELISA 等。