1 试剂
1.1 消化液
1.1.1 1M 三羟甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCl）（pH8.0）
三羟甲基氨基甲烷 12.11 g
灭菌双蒸水 80 mL
浓盐酸 调pH 至8.0
灭菌双蒸水 加至100 mL
1.1.2 0.5M 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）溶液（pH8.0）
二水乙二胺四乙酸二钠 18.61 g
灭菌双蒸水 80 mL
氢氧化钠 调pH 至8.0
灭菌双蒸水 加至100 mL
1.1.3 20%十二烷基磺酸钠（SDS）溶液（pH7.2）
十二烷基磺酸钠 20 g
灭菌双蒸水 80 mL
浓盐酸 调pH 至7.2
灭菌双蒸水 加至100 mL
1.1.4 消化液配制
1 M 三羟甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCl）（pH8.0）2 mL
0.5 mol/L 乙二胺四乙酸二钠溶液（pH8.0）0.4 mL
20% 十二烷基磺酸钠溶液（pH7.2）5 mL
5 M 氯化钠 4 mL
灭菌双蒸水 加至200 mL
1.2 蛋白酶K 溶液
蛋白酶K 5g
灭菌双蒸水 加至250 mL
1.3 酚/氯仿/异戊醇混合液
碱性酚 25 mL
氯仿 24 mL
异戊醇 1 mL
1.4 2.5 mmol/LdNTP
dATP（100 mmol/L）20 μL
dTTP（100 mmol/L）20 μL
dGTP（100 mmol/L）20 μL
dCTP（100 mmol/L）20 μL
灭菌双蒸水 加至800 μL
1.5 8pmol/μL PCR 引物
上游引物ATXU（2 OD）加入701 μl 灭菌双蒸水溶解，下游引物ATXD（2 OD）加入697 μL 灭菌双蒸水溶解，分别取ATXU、ATXD 溶液各300 μL，混匀即为8 pmol/μL 扩增引物。
1.6 0.5单位Taq DNA 聚合酶
5 单位Taq DNA 聚合酶 1 μL
灭菌双蒸水 加至10 μL
现用现配。
1.7 10×PCR 缓冲液
1.7.1 1 mol/L 三羟甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCl）（pH9.0）
三羟基甲基氨基甲烷 15.8 g
灭菌双蒸水 80 mL
浓盐酸 调pH 至9.0
灭菌双蒸水 加至100 mL
1.7.2 10 倍PCR 缓冲液
1 mol/L 三羟基甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCl）（pH9.0）1 mL
氯化钾 0.373 g
曲拉通X-100 0.1 mL
灭菌双蒸水 加至100 mL
1.8 溴化乙啶（EB）溶液
溴化乙啶 0.2 g
灭菌双蒸水 加至20 mL
1.9 电泳缓冲液（50 倍）
1.9.1 0.5 mol/L 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）溶液（pH8.0）
二水乙二胺四乙酸二钠 18.61 g
灭菌双蒸水 80 mL
氢氧化钠 调pH 至8.0
灭菌双蒸水 加至100 mL
1.9.2 TAE 电泳缓冲液（50 倍）
三羟基甲基氨基甲烷（Tris）242 g
冰乙酸 57.1 mL
0.5 mol/L 乙二胺四乙酸二钠溶液（pH8.0）100 mL
灭菌双蒸水 加至1 000 mL
用时用灭菌双蒸水稀释使用
1.10 1.5%琼脂糖凝胶
琼脂糖 3 g
TAE 电泳缓冲液（50 倍）4 mL
灭菌双蒸水 196 mL
微波炉中完全融化，加溴化乙啶（EB）溶液20 μL。
1.11 上样缓冲液
溴酚蓝0.2 g，加双蒸水10 mL 过夜溶解。50 g 蔗糖加入50 mL 水溶解后，移入已溶解的溴酚蓝溶液中，摇匀定容至100 mL。
1.12 其他试剂
异丙醇（分析纯）
70%乙醇
15 mmoL/L 氯化镁
灭菌双蒸水