二、血清学诊断
2025年10月13日
二、血清学诊断
梅迪-维斯纳病为持续性感染,因此检测抗体是鉴定病毒携带者的有效方法。通过多克隆抗血清无法进行梅迪-维斯纳病毒抗原鉴别,同时由于梅迪-维斯纳病毒和山羊关节炎-脑炎病毒的抗原性密切相关,难以鉴别2 种抗体。目前检测梅迪-维斯纳病毒抗体的常用方法是琼脂凝胶免疫扩散试验和酶联免疫吸附试验,这2 种方法均是国际贸易指定的试验方法。
(一)琼脂凝胶免疫扩散试验
梅迪-维斯纳病毒抗原主要有2 种:一种是病毒囊膜糖蛋白gp135;另一种是病毒衣壳蛋白p25。这2 种抗原都是从感染细胞培养物中提取制备的,常用的是WLC-1 株。
(二)酶联免疫吸附试验
ELISA 包被抗原的制备包括以下2 种情况:一种是以全病毒作为包被抗原,用梅迪-维斯纳病毒培养物的上清液,经差速离心和表面活性剂处理后制成,提纯的全病毒抗原包括gp135 和p25;另一种是利用重组抗原和合成肽抗原,常以gag 和env 基因全部或部分节段进行表达构建,包括重组p55、p25、p17、p14 和p41 抗原,重组的gag 和env 基因产物与大肠杆菌的GST 融合蛋白融合制备包被抗原。