二、血清学诊断

二、血清学诊断

皮内毛滴虫素试验,在牛颈部皮肤皮内注射毛滴虫素0.1 mL,30~60 min测定反应。阳性反应为肉眼可见的浅斑和皮肤增厚大于2 mm。毛滴虫抗原是通过离心沉淀毛滴虫培养物,用生理盐水洗2 次所获得的,离心后的虫体在去除碎片和颗粒前放在蒸馏水中1 h。上清液用三氯醋酸处理以沉淀抗原。沉淀干燥后以粉状贮存。从沉淀中提取毛滴虫素,用乙醇洗。用1 mL 沉淀加25 mL 磷酸氢钠(11.8 g/L)40℃水浴离心提取,用酸性磷酸盐液中和。最后加1∶40 000 浓度的硫柳汞。