样品的采集和保存

1 样品的采集和保存

1.1 组织样品

1.1.1 样品的选择

用于病毒分离、鉴定的样品以发病动物(牛、羊或猪)未破裂的舌面或蹄部,鼻镜,乳头等部位的水泡皮和水泡液最好。对临床健康但怀疑带毒的动物可在扑杀后采集淋巴结、脊髓、肌肉等组织样品作为检测材料。

1.1.2 样品的采集和保存

水泡样品采集部位可用清水清洗,切忌使用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。

1.1.2.1 未破裂水泡中的水泡液用灭菌注射器采集至少1 mL,装入灭菌小瓶中(可加适量抗菌素),加盖密封;尽快冷冻保存。

1.1.2.2 剪取新鲜水泡皮3~5 g 放入灭菌小瓶中,加适量(2 倍体积)50%甘油/磷酸盐缓冲液(pH 7.4),加盖密封;尽快冷冻保存。

1.1.2.3 在无法采集水泡皮和水泡液时,可采集淋巴结、脊髓、肌肉等组织样品3~5 g 装入洁净的小瓶内,加盖密封;尽快冷冻保存。

每份样品的包装瓶上均要贴上标签,写明采样地点、动物种类、编号、时间等。

1.2 牛、羊食道-咽部分泌物(O-P 液)样品

1.2.1 样品采集

被检动物在采样前禁食(可饮水)12 h,以免反刍胃内容物严重污染O-P液。采样探杯在使用前经0.2%柠檬酸或2%氢氧化钠浸泡5 min,再用自来水冲洗。每采完一头动物,探杯要重复进行消毒和清洗。采样时动物站立保定,将探杯随吞咽动作送入食道上部10~15 cm 处,轻轻来回移动2~3 次,然后将探杯拉出。如采集的O-P 液被反刍胃内容物严重污染,要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。

1.2.2 样品保存

将探杯采集到的8~10 mL O-P 液倒入25 mL 以上的灭菌玻璃容器中,容器中应事先加有8~10 mL 细胞培养液或磷酸盐缓冲液(0.04 mol/L、pH 7.4),加盖密封后充分摇匀,贴上防水标签,并写明样品编号、采集地点、动物种类、时间等,尽快放入装有冰块的冷藏箱内,然后转往-60℃冰箱冻存。通过病原检测,做出追溯性诊断。

1.3 血清

怀疑曾有疫情发生的畜群,错过组织样品采集时机时,可无菌操作采集动物血液,每头不少于10 mL。自然凝固后无菌分离血清装入灭菌小瓶中,可加适量抗菌素,加盖密封后冷藏保存。每瓶贴标签并写明样品编号,采集地点,动物种类,时间等。通过抗体检测,做出追溯性诊断。

1.4 采集样品时要填写样品采集登记表