分子生物学诊断

在锥虫病的诊断上，分子生物学技术主要是在DNA 4 种核苷酸序列的基础上建立起来的鉴定技术。首先发展起来的方法是DNA 测序技术和DNA探针合成技术。1989年，PCR 技术第一次用于锥虫病的诊断与鉴定。后来又出现了DNA 探针与PCR 联合技术。2003年，以布氏锥虫鞭毛袋蛋白A1 基因设计引物，用环介导等温扩增反应对伊氏锥虫进行诊断。

PCR 诊断寄生虫病的主要目的是鉴定寄生虫虫种，因此只要把锥虫基因组中那些高度重复的序列作为靶基因进行扩增即可。目前用于检测牛锥虫的PCR 引物主要有以下3 种：以核DNA 小染色体上的卫星DNA 作为种特异性引物建立的PCR。卫星DNA 是一种最受欢迎的靶基因，其敏感性非常高，能够检测非常少量的寄生虫DNA。以动基体小环形DNA 序列作为特异性引物建立的PCR。动基体小环形DNA 序列是检测伊氏锥虫和枯氏锥虫非常好的特异性引物的靶基因。以核糖体DNA 内部转录间隔序列作为特异性引物建立的PCR，核糖体DNA 内部转录间隔序列是锥虫的PCR 诊断适宜的序列。用核糖体DNA 内部转录间隔序列生成的引物，可以使用简单PCR技术进行多虫种特异性诊断。