有补体参与的试验
2025年10月13日
三、有补体参与的试验
(一)原理
补体是机体非特异性免疫的重要体液因素,当被抗原抗体复合物或其他激活物被激活后,可表现为杀菌及溶菌,起到辅助和加强吞噬细胞和抗体等防御能力的作用。补体结合试验中有5 种成分参与反应,分属3 个系统:反应系统(抗原与抗体)、补体系统、指示系统。其中反应系统与指示系统争夺补体系统,测定时先加入反应系统和补体,给其以优先结合补体的机会,若反应系统存在待测抗体(或抗原),则抗原、抗体发生反应后可结合补体,再加入指示系统。由于反应中无游离的补体而不出现溶血,为补体结合试验阳性。
(二)操作步骤
试验分2 步进行:一是反应系统作用阶段,由倍比稀释的待检血清加最适浓度的抗原和补体,混合后37℃水浴作用30~90 min 或4℃冰箱过夜。二是溶血系统作用阶段,在上述管中加入致敏红细胞,置37℃水浴作用30~60 min,观察是否有溶血现象,若不溶血,则说明待检的抗体与相应抗原结合,反应结果是阳性,反之则为阴性。
补体结合试验是一种传统的免疫学技术,能够沿用至今说明它本身有一定的优点:一是灵敏度高,补体活化过程有放大作用,比沉淀反应和凝集反应的灵敏度高得多,能测定0.05 μg/mL 的抗体,与间接凝集法的灵敏度相当。二是特异性强,各种反应成分事先都经过滴定,选择了最佳比例,出现交叉反应的概率较小。三是应用面广,可用于检测多种类型的抗原或抗体。四是易于普及,试验结果显而易见;试验条件要求低,不需要特殊仪器,或只用光电比色计即可。但是补体结合试验参与反应的成分多,影响因素复杂,操作步骤烦琐且要求十分严格,稍有失误便会得出不正确的结果。