一、病原分离培养

可取病畜的组织，心血、肝、脾等组织器官及体液、分泌物及局部病灶的渗出液做涂片，用瑞氏染色或美蓝染色，镜检。本菌为两极着色有荚膜的球杆菌。分离培养一般是无菌取以上组织及分泌物等划线接种于鲜血琼脂平板上，37℃条件下培养24 h，见有光滑、灰色光泽的半透明菌落，直径约1 mm，在折光下检查时现蓝绿色或橘红色荧光，在麦康凯琼脂上不生长。根据牛多杀性巴氏杆菌的生化特性做进一步的鉴定，可将培养物接种到实验动物体内，常用的试验动物有小鼠和家兔。实验动物死亡后立即剖检，并取心血和实质脏器分离及涂片染色，镜检，见大量两极浓染的细菌即可确诊。