(一)实验原理

(一)实验原理

1.计数板的构造 如图5-10所示,每块计数板由H 型凹槽分为2个同样的计数小室,小室两侧各有一支持柱,将盖玻片覆盖其上,形成高0.1 mm 的计数小室,小室内有一长、宽各3.0 mm 的正方形区域,整个区域又分为9个大方格。四角的4个大方格是白细胞和一般常见哺乳动物细胞的计数区域,每个大方格用单线划分为16个中方格,每个大方格面积为1.0 mm×1.0 mm=1.0 mm2,体积为1.0 mm2×0.1 mm=0.1 mm3。中央大方格又被分成25个中方格,每个中方格用单线划分为16个小方格,每个小方格的面积是0.04 mm2,容积为0.004 mm3,位于正中及相邻的4个小方格是红细胞、血小板、各种类型的酵母和精子细胞等的计数区域。

图示

图5-10 细胞计数板的构造和计数方式(https://www.daowen.com)

2.计数的原则 ①只数完整的细胞;②聚集成团的细胞只按照一个细胞计算;③“计上不计下,计左不计右”,也就是说,凡是接触到上边和左边边线的细胞均计数在内,凡是接触到下边和右边边线的细胞不计数在内;④在计数每一个大格时,从上到下以“之”字形的方式计数,计数完1个大格后,再任选邻接的一个大格继续计数,依次计完为止。

3.细胞密度计算公式 细胞数/ml=(4个大方格细胞数总和A/4)×稀释倍数α×104