Cre/LoxP系统的构成
2026年07月08日
(一)Cre/LoxP系统的构成
Cre/LoxP重组系统最先在P1噬菌体中发现,主要由位点特异性Cre重组酶和LoxP序列组成。Cre重组酶来自噬菌体的Cre基因,是整合酶家族的一员。它由343个氨基酸组成,分子量为38 kD,可以识别特定的LoxP DNA 序列位点。LoxP位点由34 bp碱基组成,包括一个8 bp的间隔序列和两个13 bp的反向重复序列。LoxP序列可以位于不同或相同的DNA分子上,同一分子上既可同向也可反向,从而使LoxP位点间的基因序列被删除或重组。
Cre重组酶介导LoxP位点间进行三种方式的基因重组:①Cre重组酶删除在基因单链两端方向相同的LoxP位点之间的DNA序列。②Cre重组酶反转在基因单链两端方向相反的LoxP位点之间的DNA序列。③若两个LoxP位点在不同DNA 链或染色体上,Cre重组酶能使目的基因在两条DNA链或染色体间发生位置互换。(https://www.daowen.com)
在转基因小鼠和哺乳类细胞中,主要是利用Cre/LoxP系统,设计不同的LoxP位点形成基因的特异性重组,Cre酶能够在特定的时间(动物的特定的发育阶段)和空间(特定的靶组织和细胞)下表达,实现对特定基因的改变。利用此系统构建基因表达载体,可以实现基因敲除、基因易位、基因反转和基因活化等。