免疫标记技术

(一)免疫标记 技术

免疫标记技术是以抗原抗体反应与标记技术相结合,将已知的抗体或抗原标记上示踪物质,通过检测标记物,间接测定抗原抗体复合物,常用的标记物有酶、荧光素、放射性核素、化学发光物质及胶体金等。免疫标记技术能对抗原或抗体进行定性和精确定量测定,且结合光镜或电镜技术,能观察抗原、抗体或抗原抗体复合物在组织细胞内的分布和定位。

免疫标记技术包含免疫酶测定、免疫荧光技术、放射免疫测定法、发光免疫测定、免疫胶体金技术、免疫印迹技术等。其中,免疫酶测定法(enzyme immunoassay,EIA)是一种用酶标记一抗或二抗检测特异性抗原或抗体的方法,将抗原抗体反应的高度特异性与酶对底物的高效催化作用相结合,通过酶标仪测定酶分解底物产生的有色物质(酶也可作用于荧光底物,使之产生荧光)的光密度值(OD),计算抗原或抗体的含量。用于标记的酶有辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)等,常用的方法有酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和酶免疫组化技术。