（四）脂类染色法

脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。脂类染色可以显示细胞内的脂滴，在动脉粥样硬化时可显示病灶内沉积的脂质和类脂。脂类染色以4%甲醛钙溶液固定组织最佳，不能用乙醇固定或含其他有机溶剂固定。常采用冷冻切片法。脂类染色使用湿性封固剂（甘油或甘油明胶）封固时，不能用吸水纸吸除多余封固剂或用镊子压迫盖玻片赶出气泡。若有气泡可将切片浸入温水中去掉盖玻片后，重新封固。

1.苏丹Ⅲ或Ⅳ染色法

试剂配制：苏丹Ⅲ或Ⅳ染液。苏丹Ⅲ0.15 g或苏丹Ⅳ1～2 g，60%～70%乙醇50 ml、丙酮50 ml。苏丹Ⅲ或Ⅳ溶于丙酮内，再加入乙醇，加盖保存，防止乙醇、丙酮挥发。使用前须过滤。

操作步骤：①冰冻切片，厚8～10μm。②入过滤后的苏丹Ⅲ或Ⅳ染液15～30 min，染色时应加盖防止染液挥发。③50%～70%乙醇分化，洗去切片上的浮色，纯水洗。④用稀释1倍的明矾苏木素浅染细胞核1 min，盐酸乙醇分化、返蓝。⑤用滤纸将切片周围水分吸干；50%缓冲甘油或甘油明胶封固。

结果：脂肪呈橘黄色或橘红色，胞核呈浅蓝色。

2.油红“O”染色法 该法主要用于显示中性脂肪，特点是着色深，能将较小的脂肪滴显示出来。(https://www.daowen.com)

固定：4%中性甲醛、甲醛钙固定液。

试剂配制：①油红饱和液。油红“O”0.5 g，溶于100 ml异丙醇（含量98%）中，可长期保存备用。②油红稀释液。取油红饱和液6 ml，加纯水4 ml，静置5～10 min后过滤后使用。

染色步骤：①冰冻切片，厚8～10μm。②纯水充分洗涤。③油红稀释液10～15 min，避光、密封。④60%乙醇镜下分化至间质清晰。⑤纯水洗，Harris苏木素复染核。⑥纯水洗，甘油或甘油明胶封片。

结果：脂肪呈鲜红色，胞核呈蓝色，间质无色。

注意事项：①油红染色时应避免试剂挥发过多，否则易形成背景沉淀。②60%乙醇分化，应于镜下控制至脂肪组织呈鲜红色，间质无色时为度。