（二）光路系统

被检测细胞经流体动力学聚焦后，成一单列流过光路系统。光路系统是流式细胞仪的关键系统，包括激发光系统和接受光系统。激发光系统包括激光器、激光光束形成元件。激光光束形成元件用于聚焦激光光束，并使它与样品流相交。接受光系统包括透镜、光栅、滤光片等，引导散射光和激发的荧光到相应的检测器——光电倍增管（PMT），形成不同的散射光信号和荧光信号。

激光器常根据其发射的激光波长来分类，如488 nm 的蓝激光器发出488 nm 的激光，是最常用的激光器。常用的还有635 nm 的红激光器、405 nm 的紫激光器、355 nm 的紫外激光器。不同激光器发出的激光照射到细胞后产生的光信号会经过不同的光路被不同的通道接收，上述激光器通道分配见表11-1。

表11-1　常用激光器及其通道分配表(https://www.daowen.com)

激光照射到样品流中的细胞后会产生散射光，如果细胞上结合有荧光素，而荧光素刚好可被这种波长的激光激发，荧光素就会向四周发射荧光。流式细胞仪采集的光信号包括散射光信号和荧光信号两种。散射光信号包括与激光相同方向接受的前向角散射光（forward scatter，FSC）和与激光方向呈90°角的侧向角散射光（side scatter，SSC），FSC表征细胞的体积大小，SSC表征细胞的颗粒度。荧光信号也是在与激光束呈90°角方向被接收。在激光束90°角方向接收到的SSC和各荧光信号是混合在一起的，流式细胞仪通过光路系统，根据波长的不同将SSC和各荧光信号分开，由不同的接收通道接收，然后根据信号强弱反映细胞的生物学特征。