(二)染色方面

(二)染色方面

1.是否有效去除内源性过氧化物酶和生物素 ①灭活内源性过氧化物酶,0.3%H2 O2甲醇溶液,组织标本10~20 min,细胞标本5~10 min。②饱和生物素:ABC或SP法染色前将切片浸于0.01%抗生物素溶液中20 min,PBS清洗15 min,染色。(https://www.daowen.com)

2.抑制非特异性背景着色 ①以二抗同属动物非免疫血清或一抗以外的动物非免疫血清[(1∶5)~(1∶20)]封闭组织上的带电荷基团,阻止其与一抗非特异性结合,常用1%~2%牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)封闭。②一抗浓度:在说明书建议的浓度上下两个级数中摸索最佳的一抗浓度。③切片充分冲洗。④要注意PBS的p H 和离子强度的使用和要求。