蛋白质免疫印迹技术原理

蛋白质免疫印迹（Western印迹杂交，Western blotting，Western blot）是在蛋白质凝胶电泳和固相免疫测定的基础上发展而来，可从蛋白质混合物中检出目标蛋白质，定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况，用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。以聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）分离蛋白质（多肽）样品，转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质（多肽）。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白质成分（图9-1、图9-2）。(https://www.daowen.com)

图9-1　酶标记底物显色检测示意图