T4 DNA 连接酶介导的质粒和PCR 产物的连接反应

经过特定限制性内切酶切割后的质粒序列和PCR产物可形成完全互补的黏性末端序列。在连接酶的催化下，质粒序列和PCR产物就可以连接在一起，形成一个新的重组质粒（图12-5）。实验室最常用的连接酶是T4 DNA连接酶，一般是从T4噬菌体感染的大肠埃希菌中提取纯化而来。下面以T4 DNA连接酶介导的黏性末端的连接反应来说明常规的实验操作。

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图12-5　T4 DNA连接酶介导的质粒和PCR产物的连接反应