光电倍增管电压的设定

流式细胞仪利用光电倍增管（PMT）将各通道检测到的荧光信号转变为电子信号进行分析，同时按照一定的比例关系提高电子信号的强度，这是通过分析软件调节光电倍增管的电压来实时调控的。电压设置越低，光信号转化为电子信号增强的倍数就越小，得到的电子信号就越弱；反之，电压设置越高，增强的倍数就越大，得到的电子信号就越强。

1.FSC和SSC通道电压的调节 通常使用blank管或阴性对照管（最好是同型对照管）来调节各通道电压。FSC和SSC通道是每次流式检测都需要使用的通道，其接收的是散射光信号，与荧光素偶联抗体是否标记无关。FSC通道主要反映的是细胞体积，SSC通道主要反映细胞的颗粒度。在FSC-SSC散点图中，调整电压的目标是使样品细胞或目标细胞位于流式图的中央或靠近中央的位置。(https://www.daowen.com)

2.荧光通道电压的调节 使用Blank管或阴性对照管调电压时，荧光通道上接收到的是样品细胞的非特异性自发荧光。在直方图中，调整电压使自发荧光控制在数轴的1／4范围内，设为阴性细胞。同时，可以上样阳性细胞管（正常组或模型组等染色细胞）查看阳性细胞群不要跳出流式图数轴外，最好控制在流式图数轴3／4范围内。如果跳出数轴外，就要降低电压值。在使用Blank管或阴性对照管调好电压之后，建议使用全染的样品管复检电压值，尤其防止各荧光通道阳性群体跳出检测范围。