组织脱钙方法

(一)组织脱钙方法

1.酸溶液脱钙

(1)硝酸类脱钙液:硝酸5 ml+纯水95 ml。每1 g组织约需脱钙液30 ml,脱钙时间2~3 d,标准为针刺组织无抵抗为止。脱钙时严禁盖瓶盖,以使脱钙时产生的气泡逸出。脱钙后用弱碱性水溶液(如碳酸锂水溶液)中和后流水冲洗24 h。

(2)三氯醋酸类脱钙液:三氯醋酸5 g+10%甲醛95 ml。此液脱钙作用缓慢,适合胚胎及幼年动物的骨组织。脱钙后切勿流水冲洗,应转入90%乙醇中浸洗数次。(https://www.daowen.com)

2.螯合脱钙 常用10%乙二胺四乙酸(EDTA)水溶液(p H 7.0)。该种方法脱钙作用缓慢,需2周至3个月不等。特点是能保存骨组织中的酶类(适用于免疫组织化学和免疫荧光染色),并能除去金属离子如铁、镁和铅。不超过5 mm 厚度的小块组织在此液中每4~5天换液1次,更换3次后再每天换液1次。

3.电解脱钙 在直径不小于30 cm 的玻璃容器里装电解液(50%盐酸水溶液)(电解液温度控制在45℃以下),将需要脱钙的组织捆于铂金丝或钨丝上作为阳极,在电解液的另一端放一铂金丝或钨丝作为阴极,通入6 V左右的直流电,一般在2~6 h即可达到脱钙要求。