(一)差异筛选与数据分析
通常选取肿瘤细胞及其对应的正常上皮细胞,抽提细胞培养上清液中外泌体并利用电镜观察分离得到的外泌体形态,NTA分析其大小,免疫印迹技术检测蛋白质标志物,以鉴定分离到的是否为外泌体。随后,利用miRNA 芯片对来源不同的外泌体miRNA 进行检测和聚类分析,发现差异表达的miRNA,并应用生物信息学和系统生物学方法和技术进行miRNA 靶基因预测、miRNA碱基编辑分析及miRNA调控网络构建等。
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图17-5 外泌体miRNA研究策略