(三)质粒摇菌扩增
(1)一般培养12~16 h后即可观察到明显的转化成功的菌落出现。这时,将长出菌落的培养板、含有相应抗生素的LB液体培养基用乙醇消毒后拿进超净台。
(2)标记几支50 ml离心管,向其中倒入10~15 ml LB液体培养基。(https://www.daowen.com)
(3)使用200μl吸头挑取一个的单克隆菌落,将枪头直接打到加好培养基的50 ml离心管中,每个连接反应转化的培养平板挑取5~6个单克隆菌落放到5~6支50 ml离心管中。注意在挑取单克隆菌落过程中不要碰到其他菌落,一旦碰到就丢弃吸头,换新吸头重新挑取单菌落,严格防止菌落之间的污染。
(4)挑取好5~6管后,盖紧管盖,标记好后,放到37℃摇床220 rpm 振荡,过夜培养(12~16 h)。