高效液相色谱相关术语

(三)高效液相色谱相关术语

1.色谱图术语

色谱图(chromatogram):样品流经色谱柱和检测器所得到的响应信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(图19-1)。

图示

图19-1 色谱图

图示

图19-2 不同峰形的色谱峰

基线(base line):经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的平直的流出信号曲线。

噪声(noise):基线信号的波动。

漂移(drift):基线随时间的缓缓变化。

色谱峰(peak):组分流经检测器时响应的连续信号产生的流出曲线上的突起部分,正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线[高斯(Gauss)曲线]。不对称色谱峰有两种:前伸峰(leading peak,后沿陡峭,前沿较后沿平缓,T <0.95)和拖尾峰(tailing peak,前沿陡峭,后沿较前沿平缓,T>1.05)(图19-2)。

拖尾因子(tailing factor,T):用以衡量色谱峰对称性的度量。实验中应尽量通过调整条件使峰形接近于正态分布曲线,即:0.95≤T≤1.05。(https://www.daowen.com)

峰宽(peak width,W):峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。峰面积(peak area,A):峰与峰底所包围的面积。

其他如半峰宽、峰底、峰高、鬼峰和标准偏差等术语可查阅相关资料。

2.定性定量分析术语

等度洗脱(isocratic elution):在同一个分析周期中,流动相比例和流速恒定不变的洗脱方式。

梯度洗脱(gradient elution):在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相浓度配比的洗脱方式。又称程序洗脱。该法可使性质差异较大的组分实现良好地分离。

死时间(dead time,t0):不保留组分的保留时间,即流动相通过色谱柱的时间。

保留时间(retention time,tR):从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值(色谱峰尖)的时间。

理论塔板数(theoretical plate number,N):用于定量表示色谱柱的柱效,即组分在色谱柱中的分离次数。

分离度(resolution,R):指相邻两峰保留时间之差与平均峰宽的比值,表示相邻两峰的分离程度。R=2(tR2-t R1)/(W1+W2)。《中国药典》规定R>1.5,此时两色谱峰完全分离,裸露峰面积>99.7%。提高分离度的途径:①降低塔板高度来增加塔板数,提高柱效(用粒径小的色谱柱)。②增加选择性,如改变流动相的组成及p H、改变柱温、改变固定相。

其他如死体积、调整保留时间、保留体积、调整保留体积和容量因子等术语不再赘述。