（一）实验材料

1.实验仪器与耗材 -80℃冰箱，4℃／-20℃冰箱，微量移液器，生物安全柜，1.5 ml EP管，恒温摇床，37℃细菌培养箱，50℃烘箱，10 cm 细菌培养皿，恒温水浴锅，制冰机，记号笔，玻璃涂布棒，细菌接种环。(https://www.daowen.com)

2.实验试剂 T4 DNA连接酶（M0202，NEB），PCR产物，线性化质粒，LB液体培养基，LB固体培养基，Amp母液，Kan母液，E.coli DH5α感受态细胞。