纳米颗粒跟踪分析技术

(三)纳米颗粒跟踪分析 技术

纳米颗粒跟踪分析技术是近年来新兴的纳米级别测量技术之一,利用光散射和布朗运动的特性获得液体悬浮液中的样本粒度分布,对10~2 000 nm 范围内颗粒进行实时动态检测。

1.基本原理 激光光束穿过样本室并沿光束散射光的路径穿过悬浮液中的颗粒,使用光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号,通过仪器内置的高速相机捕捉布朗运动下移动颗粒的影像,对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析,计算出其流体力学直径和浓度。

2.纳米颗粒跟踪分析技术在外泌体鉴定中的应用 目前纳米颗粒跟踪分析技术已逐渐成为外泌体鉴定的三大标准之一。检测流程可概括为:将提取到的外泌体用PBS稀释至106/ml,用1 ml注射器注入纳米颗粒跟踪分析仪,激光光束穿过样本室悬浮液中的外泌体,通过显微镜实现外泌体的可视化,捕捉其布朗运动,从而计算出其流体力学直径和浓度。该技术具有极高的分辨率,甚至可分辨出粒径相对差异在1∶1.5的纳米颗粒,这一特性对外泌体的鉴定极为重要。此外,分析仪所具备的溶液状态,可保护外泌体的结构和功能,且让外泌体在更为接近其自然状态下进行检测,可保证数据的有效性。同时,纳米颗粒跟踪分析技术还能对荧光样品进行分析。在复杂背景下,可用荧光抗体标记外泌体表面的蛋白质标志物CD63、CD9、CD81等,应用分析仪的荧光测量功能实现对外泌体的鉴定。