(一)实验材料

(一)实验材料

1.实验仪器与耗材 -80℃冰箱,4℃/-20℃冰箱,微量移液器,生物安全柜,1.5 ml EP管,恒温摇床,37℃细菌培养箱,50℃烘箱,恒温水浴锅,制冰机,记号笔,水平电泳槽,紫外分光光度计,紫外凝胶成像分析系统,微波炉,100 ml三角烧瓶,制胶架,PCR扩增仪,紫外割胶仪,刀片。(https://www.daowen.com)

2.实验试剂 引物(由生物技术公司合成),高保真DNA 聚合酶(PrimeSTAR DNA Polymerase,R045A,Takara),pcDNA3.1(+)质粒(Thermofisher,图12-3),Bam H Ⅰ、XhoⅠ限制性内切酶(NEB 或Takara),PCR 仪,琼脂糖,TBE 缓冲液,DNA marker(NEB 或Takara),GelGreen(10 000×),6×Loading Buffer。