常用实验动物的采血操作
大、小鼠的血液采集方法有多种,最常用尾静脉采血法、眼窝静脉丛采血法、腹主动脉采血法、心脏采血法、颈静脉采血法等。
1.大鼠常用采血技术
(1)尾静脉采血(切割):大鼠尾部皮肤较厚且不透明,尾静脉常不清晰,尾表皮高度角质化,针刺采血难度较高,切割相对容易,每次能采得0.1~0.2 ml,其操作类似于尾静脉注射。采血前准备大鼠固定器,温水浸泡尾部5 min。将大鼠置入固定器,留出尾部,以刀片垂直切开表皮和静脉,即可见暗红色静脉血涌出,用毛细血管收集并按压伤口止血。如需多次采血,应从尾尖向尾根依次处理,每次间隔1 cm 以上,左右静脉交替进行。固定尾部时应注意靠近尾尖1/3处的表皮,操作太过用力容易脱落。
(2)眼部采血:分为眼球后静脉丛采血和眼眶动静脉采血(取眼球采血),该采血途径曾被广泛使用,但由于越来越多的不良潜在反应被发现,并出于动物福利的考虑,现在已基本不使用。
(3)心脏采血:将大鼠麻醉后仰卧位保定。手指在体表感觉心搏大致判断心脏位置,针头从剑状软骨与腹腔间凹陷处刺入,向上倾斜30°角向心刺入,见回血即可抽取,一次采血量为1~2 ml(图6-11)。采血后心脏可自行修复,故采血量较少的情况下动物可存活。针头应穿刺入左心室采取动脉血,如针尖入心房,则拔针后容易造成心包膜积血,甚至血胸而死亡。由于心脏内采血具有潜在性疼痛和致命后遗症,多用于终末采血。

图6-11 心脏采血示意图
(4)颈部血管采血:分为颈静脉穿刺采血、颈动脉插管采血,常用于无须动物存活的终末性采血。
(5)隐静脉穿刺采血:不需麻醉,保定大鼠,分开两后肢,舒展股部和尾部间的皮肤,去除该部位的被毛,可见皮下位于跗关节旁的隐静脉。在该处涂以凡士林,用注射针刺破静脉,让血液自行流出,用毛细管收集,每次采血为0.2~0.4 ml,采血后稍压迫即可止血,可反复采血。(https://www.daowen.com)
(6)腹主动脉采血:为致死性的手术采血,一次采血量10 ml以上。将大鼠麻醉后仰卧保定,打开腹腔,将腹腔脏器推向一旁,可用棉球轻轻剥离腹膜,彻底暴露腹主动脉。由呈倒Y型的动脉分支处向心刺入针头采血,注意抽血速度不宜太快,否则易使动脉枯瘪而影响采血量,按摩胸腔可增加采血量。如穿刺过程刺穿动脉,应及时用血管钳夹住针头以上部位再拔针,如无大出血可继续在近心端采血。
2.小鼠常用采血技术 小鼠采血的操作技术要求与大鼠类似,可参照大鼠的同类技术。
(1)尾静脉采血:每次采血量为0.05~0.1 ml,具体操作请参照大鼠的尾静脉采血。
(2)摘眼球采血:体重20 g左右小鼠的一次采血量约为1 ml,由于采血量较大,出于动物福利的考虑只适合终末性采血。将小鼠麻醉后,头部向下徒手保定,以保定的手轻轻压迫颈部两侧,使眼球充血外凸,持眼科弯镊夹住眼球根部迅速摘除眼球。将试管靠在眼窝下收集流出血液。采血过程中应及时用镊子去除眼窝内凝血块,并按摩胸腔以增加采血量。
(3)足背静脉穿刺采血:无须麻醉,保定小鼠,拇指和示指捏住后肢膝关节迫使后肢伸直、足背向上,轻轻压迫足踝处使足背中央的静脉充盈,在皮肤处涂抹凡士林,以针头刺破该处皮肤和血管,用毛细管吸取。采血后压迫止血,可反复采血。
(4)腹主动脉采血:为致死性手术采血法,一次采血量约为1 ml,操作技术要点同大鼠腹主动脉采血。
3.豚鼠常用采血技术
(1)耳缘切割采血:保定豚鼠使其蹲伏,用刀片割破耳缘静脉,收集流出的血液。在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液可阻滞血凝而有助于采血。每次采血量约为0.5 ml。
(2)腹主动脉采血:为致死性手术采血法,一次采血量为10~20 ml,操作技术要点同大鼠腹主动脉采血。