(三)抗原修复
2026年07月08日
(三)抗原修复
抗原修复的目的是暴露抗原,增加细胞和组织的通透性,以便抗体与抗原最大限度地结合。
1.蛋白酶消化修复 0.1%胰蛋白酶(0.1 g胰蛋白酶溶于0.1%CaCl2溶液,p H 7.8)、0.4%胃蛋白酶(0.4 g胃蛋白酶溶于0.1 mol/L HCl溶液)。胰蛋白酶法主要用于细胞内抗原的修复,37℃消化5~10 min;胃蛋白酶法主要用于细胞间质或基底膜抗原的修复,37℃消化
30 min。
2.抗原热修复(HIAR)(https://www.daowen.com)
(1)高压法:将1 500~3 000 ml的枸橼酸盐缓冲液(p H 6.0)注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上,放入锅内,使切片位于液面以下,盖上锅盖,扣上压力阀。当压力锅开始慢慢喷气时(加热5~6 min后),计时1~2 min,然后将压力锅端离热源。取下气阀,打开锅盖,自然冷却。
(2)微波法:切片放入盛有枸橼酸盐缓冲液(p H 6.0)的容器中,微波炉内加热使容器内液体温度保持在92~98℃并持续10~15 min。自然冷却。
(3)水浴法:切片放入盛有枸橼酸盐缓冲液(p H 6.0)的容器中,并将此容器置于盛有一定数量自来水的大器皿中,加热沸腾,从小容器的温度到达92~98℃起开始计时15~20 min,然后断火,自然冷却。