一、水提纯溶法

一、水提纯溶法

玫瑰茄多糖主要存在于玫瑰茄的花萼中。为了降低多糖提取过程中其他杂质的含量,提升实验的精准性,去除花萼中的其他物质,主要为黄酮、色素以及单糖等物质。将干燥后的玫瑰茄经过石油醚进行反复回流脱脂处理,在室温下晾干得到花萼粉末。之后在粉末中加入75%的乙醇浸泡液溶解相关杂质,经晾晒后得到只含有多糖的玫瑰茄花萼粉末。

1.多糖的水提流程

采用水提醇沉法进行玫瑰茄多糖提取。称取预处理后的玫瑰茄粉末5g,置于圆底烧瓶中,按一定料液比、水浴温度和浸提时间在热水浴中回流浸提数次,冷却后将所得水提液抽滤,去除杂质,合并上清液。上清液经减压浓缩,除去蛋白后,加入一定量无水乙醇至终浓度为80%充分搅拌,放入4℃冰箱,静置12h,3000r/min离心10min,收集沉淀。蒸馏水复溶,于透析袋中(截留分子量3500Da)透析72h。透析后的样品经冷冻干燥,即得玫瑰茄粗多糖。

2.玫瑰茄多糖提取单因素影响

(1)液料比

当液料比低于1∶25时,随着液料比的增加,玫瑰茄多糖的得糖率逐渐提升;当液料比达到1∶25时,多糖得率最高;随着液料比的继续增加,多糖得率将会逐渐降低。因为是随着溶剂量的降低,多糖溶解量明显不足,导致多糖得率明显偏低。但是,随着用水量的增加,多糖溶液将达到饱和,初始用水量也会进一步增加后续的溶液浓缩,进而导致提取效率逐渐降低。(https://www.daowen.com)

(2)提取时间

提取时间低于3h时,多糖得率将随着提取时间的上升而逐步提升;当提取时间超过3h时,多糖得率并不会继续上升。因此,在进行玫瑰茄多糖提取时,应选择3h为最佳提取时间。

(3)提取温度

提取温度在60~90℃时,随着温度的提升,多糖得率不断提升;但当提取温度超过90℃后,多糖得率有明显下降。因此,在进行玫瑰茄多糖提取时,应选择90℃为最佳提取温度。

3.响应面法提取工艺

响应面法提取玫瑰茄粗多糖最优的提取工艺条件为最大响应值时,液料比、提取时间、提取温度对应的编码值分别为0.123、0.129、0.004,与其相对应的多糖最佳提取条件是液料比1∶25.62(g/mL)、时间3.13h、温度90.04℃,理论最佳提取率是14.46%。考虑到实际情况对上述条件进行修正,最终的优化条件调整为液料比1∶26(g/mL)、提取时间3.1h、提取温度90℃。在此条件下进行3次平行实验验证,提取率为14.41%,与理论预测值较接近,说明该响应面法优化得到的模型准确可靠,适用于玫瑰茄粗多糖的提取。