玫瑰茄愈伤组织的培养

1.植物生长调节剂的影响

生长素的最适使用浓度也决定于细胞种类，常用的浓度范围为0.1～5mg/L。愈伤组织培养经常使用的生长素有IAA、NAA（α-奈乙酸）及2，4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）。IAA在细胞中容易代谢，较短的时间就降至低浓度水平；而NAA抑制玫瑰茄愈伤组织产花青素，所以在培养玫瑰茄细胞时使用2，4-D，使用量为1mg/L。

激动素（Kinetin，KT）是一种细胞分裂素，可促进细胞分裂，保持细胞膜的完整性，防止细胞衰老。在植物培养细胞中使用浓度为0.01～1mg/L，高KT浓度时，玫瑰茄愈伤组织结团性严重，细胞团结构紧密，有的质地坚硬，继续培养困难；低KT浓度时，细胞分散，愈伤组织生长良好，有利于细胞的悬浮培养及单细胞的获得。培养基KT浓度为0.2mg/L时，经过数次继代培养，许多黄色的玫瑰茄愈伤组织开始出现小的红色区域，产生花青素的细胞。在悬浮培养时，为获得分散良好的细胞，取KT浓度为0.1mg/L。

2.pH的影响(https://www.daowen.com)

植物细胞培养基初始pH一般在5～6。pH5.4时，玫瑰茄愈伤组织红黄相间，表面湿润，细胞生长较弱，产生色素细胞少；pH5.6时，愈伤组织红黄相间，表面湿润，细胞生长较弱，产生色素细胞少；pH5.8，愈伤组织黄红间色，表面较干，细胞松散，生长良好，产色素细胞色深；pH6.0，愈伤组织红黄间色，表面干松，细胞松散，生长良好，产色素细胞颜色变浅。综合比较认为：玫瑰茄愈伤组织生长适宜的pH为5.8，悬浮培养时，pH采用5.8。

3.温度的影响

培养物生长温度通常在20～25℃，次生物质生产的最适温度与生长温度不同。当温度低于15℃时，细胞生长与产物生成均停止，而在其他温度（30℃）下，细胞只能维持生长。产物、前体，甚至合成途径中的相邻化合物的积累均需要不同的温度。改变温度，可能引起次生物质生产数量上或质量上的变化，后者要求激活新的基础的生物合成途径。温度依赖性可能也是引起连续继代培养中产物积累速率变化的原因，玫瑰茄细胞培养温度以24～26℃为宜，后面培养均采用25℃。