兴奋剂测检方法简介

五、兴奋剂测检方法简介

尿液是兴奋剂检查的理想样本。其优点是:取样方便,对人无损害;尿中药物的浓度高于血浓度;尿中其他成分对分析的干扰少。检查分取样和实验室分析两部分。

(一)取样

受检运动员与陪同人员到达指定的兴奋剂检查地点后,兴奋剂检查工作人员将陪同在候检室等候,并向受检运动员讲解留样全过程。受检运动员到达的时间和个人情况均应在兴奋剂检查记录单上写明。

在进行兴奋剂检查取样之前,兴奋剂检查工作人员应向受检运动员出示由反兴奋剂委员会颁发的身份证及授权收集检查样品的证明,并仔细检查核对受检运动员的身份证和比赛号码以及兴奋剂检查通知单来验明运动员的身份。

除非有紧急的医疗问题或参加颁奖,受检运动员不得离开兴奋剂检查指定地点。

受检运动员应在同性别兴奋剂检查工作人员的监督下,完成以下留样程序:

1.受检运动员自己选择一个装在没有开封的口袋内的留尿杯子。

2.受检运动员将尿(不少于75毫升)排入一次性留尿杯中。

3.受检运动员自己动手选择一套密封的、刻有号码的、干净的、未使用过的样品瓶(A瓶和B瓶)。

4.留尿后即刻,受检运动员自己将尿分别倒入A瓶(50毫升)及B瓶(25毫升)中,并在留尿杯中留少许尿(供查pH值用),也可请兴奋剂检查工作人员完成上述过程,然后兴奋剂检查工作人员将瓶塞或铝盖封好,贴上印有瓶号的封条或用火漆封上,盖上兴奋剂检查印章。

5.受检运动员应注意封尿瓶过程,兴奋剂检查工作人员应给受检运动员和陪同人员有机会核查瓶子是否封好,并核对尿瓶号码是否与兴奋剂检查单记录上的号码一致。

6.如运动员认为整个留尿过程符合上述规定,应在兴奋剂检查记录单上签名确认,兴奋剂检查工作人员和陪同人员(若有的话)也应在兴奋剂检查记录单上签名。如果反兴奋剂委员会(或主办单位反兴奋剂机构)或竞赛兴奋剂检查委员会的代表在场,他也应在检查记录单上签字。

7.如果运动员或陪同人员对取样过程不满意,认为不符合本细则的有关规定,可以把意见写在兴奋剂检查记录单上,并写明理由,也可直接向在场的反兴奋剂委员会或单项运动协会的代表提出申诉。如此栏空白或未提出申诉,则表明该运动员确认整个取样过程符合规定。

8.兴奋剂检查记录单一式四份,第一份交兴奋剂检测实验室,第二份交竞赛兴奋剂检查委员会(或兴奋剂检查组)或赛外兴奋剂检查的反兴奋剂委员会代表保存,第三份转交该受检运动员的单项运动协会,第四份由受检运动员本人保存。

如尿量不足75毫升时,应先将尿瓶封存编号(由运动员自己保存好),然后,受检运动员应继续留尿,待尿量足够时为止。前后尿样混合后,再倒入A瓶和B瓶。如果在相当一段时间内受检运动员不能提供足够量的尿样,此事实须记录在案,由竞赛兴奋剂检查委员会或兴奋剂检查组确定采取下一个程序(包括送受检运动员去运动员驻地进行取样)。

兴奋剂检查工作人员用留尿杯中剩余的尿样进行pH值及比重测定。pH值应在5~7之间,比重应大于或等于1.010。如果不符合上述规定,兴奋剂检查工作人员可要求受检运动员重新留一份尿。在兴奋剂检查取样时,无关人员不得在场。

(二)样本分析

100余种禁用药物在尿中可以出现的药物原体、代谢产物和相关化合物达400余种,而且含量在毫微克水平,样本分析是一个技术难度相当大的工作。分析大体分筛选和确认两个过程。筛选即对所有样本全部过筛。当发现某样本可疑有某种药物时再对此样本进行该药物的确认分析。

分析过程中按药物的化学特性和分析方法将禁用药用分成四类,第一类:尿中以游离形式排泄的易挥发性含氮化合物;第二类:尿中与硫酸或葡萄糖醛酸结合的难挥发性含氮化合物;第三类:化学结构和特性特殊的刺激剂;第四类;合成类固醇。每份尿样按4类药物要求的不同方法提取后,进行气相色谱或高效液相色谱分析,如分析中未出现可疑者(与标准色谱图对比)为阴性。有可疑峰的尿样重新提取和选择性衍生化后进行气相-质谱联用分析,确实查出某药物的结构及分子存在时最后确认为阳性。样本分析基本上是定性分析,只要在尿样中检出药物原体或其代谢物,即可被认为是阳性。只是睾酮和咖啡因是采用定量分析。尿中睾酮/表睾酮大于6或咖啡因的浓度大于12微克/毫升时方为阳性。

有个别实验室采用放射免疫法进行合成类固醇的分析。放免法有灵敏度高、分析时间短的优点。但是由于合成类固醇药物彼此结构相近,它们与机体内源性甾体激素(20多种)的结构也相近,要求抗原抗体反应要有很高的特异性。否则很容易发生识别错误而导致假阳性或假阴性。基于这种情况,放射免疫法只能作为合成类固醇的筛选手段。确认分析仍要采用气-质联用法。