4.7.6　噬菌体展示技术

噬菌体展示技术是一种噬菌体表面表达筛选技术，也是一种用于筛选和改造功能性多肽的生物技术。其原理是将所要研究的目的基因片段插入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，在阅读框正确且不影响其他外壳蛋白正常功能的情况下，使外源多肽或蛋白质与外壳蛋白融合表达，融合蛋白随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面（图4-23）。被展示的多肽或蛋白质可以保持相对独立的空间结构和生物活性，以利于靶分子的识别和结合。然后利用靶分子，采用适当的淘洗方法洗去非特异性结合的噬菌体，最终从噬菌体文库中筛选出能结合靶分子的目的噬菌体；外源多肽或蛋白质表达在噬菌体的表面，而其编码基因作为噬菌体基因组中的一部分可通过噬菌体DNA序列测序出来。该技术的显著特点是建立了基因型和表现型之间的对应关系。

图4-23　噬菌体展示技术研究蛋白质相互作用原理图

（引自朱玉贤等，2007）

噬菌体展示技术具有两个最显著的意义：一是它引申出分子库（molecular repertoires）的概念；二是此项技术突破了研究蛋白质相互作用时需基于对其结构的详尽知识的限制，这也是该项技术得以愈来愈广泛运用的直接原因。目前，利用噬菌体展示技术构建随机肽库、蛋白质库和抗体库，研究受体或抗体的结合位置，改造和提高蛋白质、酶和抗体的生物学和免疫学属性，研究用于检测治疗用途的新型多肽药物、疫苗和抗体等，都具有广阔的应用前景。