6.2.2　重组DNA分子导入酵母细胞

酵母细胞的DNA转化有以下几种方法。

（1）原生质体法：这是最早用于酵母载体DNA转化的方法。其缺点是控制酵母细胞原生质体化的程度比较困难，转化效率不稳定。另外，细胞原生质体转化时间长、成本较高。

（2）离子溶液法：将酵母细胞用各种离子（如一价阳离子Cs+、Li+）溶液进行处理，然后进行DNA转化，能明显地增加外源DNA的吸入。这种方法的转化效率虽然不及原生质体法高，但也能达到每微克DNA 103个转化子，对于一般的应用来说已经足够高了。其优点是操作简便、容易掌握，所以很快被广泛采用。

（3）一步法：一步法是在离子溶液法基础上建立的，每微克DNA可得到104个转化子，特别适用于处于静止期的酵母细胞的转化，使酵母转化的方法变得越来越简单。

（4）PEG法：通过PEG 1000处理酵母细胞获得类感受态再转化，每微克DNA至少可得到103个转化子。

（5）电穿孔法和粒子轰击法（particle bombardment或biolistics）：电穿孔法和粒子轰击法最早用于植物细胞的DNA转化，后来证明也能用于酵母细胞的转化，常用于一些新的酵母宿主细胞的DNA转化。其优点是转化效率极高，每微克DNA能产生105个转化子。缺点是需要特殊的设备、成本较高，所以不是常规的转化方法。